Use of cooled buffalo semen as a strategy to increase conception rates in fixed-time artificial insemination programs during unfavorable reproductive periods / [Uso de sêmen resfriado de búfalo como estratégia para aumentar as taxas de concepção em programas de inseminação artificial em tempo fixo, durante períodos reprodutivos desfavoráveis]

The objective of this study was to compare the reproductive efficiency of dairy buffaloes undergoing fixed-time artificial insemination (FTAI) protocols based on progesterone/estrogen (P4/E2) and eCG during unfavorable breeding season using cooled (CS) and frozen semen (FS). A total of 446 buffaloes (> 40 days postpartum) were randomly distributed into four blocks (years): B1-2014 (n = 143), B2-2015 (n = 34), B3-2016 (n = 90), and B4-2017 (n = 179). Each block was subdivided into two (AI with CS and FS using the same ejaculate of each bull). Thus, the block subdivision was as follows: B1 (CS = 71 and FS = 72); B2 (CS = 18 and FS = 16); B3 (CS = 47 and FS = 43); and B4 (CS = 90 and FS = 89). The ejaculates of eight Murrah bulls collected using an artificial vagina were divided into two aliquots: one aliquot was diluted in Botu-Bov® commercial extender and cooled (BB-CS), and the other was diluted in the same extender and frozen (BB-FS). BB-CS aliquots were cooled at 5 °C/24 h using a refrigerator. BB-FS group aliquots were also cooled, and after equilibrating at 5 °C for 4 h, were placed in a 21-L Styrofoam box, 5 cm above the surface of liquid nitrogen. In the afternoon (A) on D0 (2:00 p.m.) the animals received EB 2.0 mg IM (Estrogin®) and an ear implant (CRESTAR® 3.0 mg P4). At D9 (A), the implant was removed, and the animals received eCG 400 IU IM (Folligon® 5000) + Cloprostenol PGF2α 0.530 mg IM (Sincrocio®). At D10 (A), the animals received EB 1.0 mg IM (Estrogin®), and at D12 (8:00 a.m.), AI was performed. At D42, pregnancy was diagnosed via ultrasonography. Total CRs were 48.2% CS and 34.6% FS for years 2014 to 2017, with a significant difference of 13.7% (P<0.05). In conclusion, cooled semen resulted in higher CR than frozen semen in dairy buffaloes under the P4/E2 and eCG FTAI during the unfavorable reproductive season.(AU)

O objetivo deste estudo foi comparar a eficiência reprodutiva de búfalas leiteiras submetidas a protocolos de inseminação artificial em tempo fixo (IATF) à base de progesterona/estrogênio (P4/E2) e eCG, durante a estação reprodutiva desfavorável, usando-se sêmen resfriado (SR) e congelado (SC) Um total de 446 búfalas (> 40 dias após o parto) foi distribuído aleatoriamente em quatro blocos (anos): B1-2014 (n = 143), B2-2015 (n = 34), B3-2016 (n = 90) e B4-2017 (n = 179). Cada bloco foi subdividido em dois (IA com SR e SC utilizando-se a mesma ejaculação de cada touro). Assim, a subdivisão do bloco foi a seguinte: B1 (SR = 71 e SC = 72); B2 (SR = 18 e SC = 16); B3 (SR = 47 e SC = 43); e B4 (SR = 90 e SC = 89). Os ejaculados de oito touros Murrah coletados com vagina artificial foram divididos em duas alíquotas: uma alíquota diluída em diluente comercial Botu-Bov® e resfriada (BB-SR), e a outra diluída no mesmo diluente e congelada (BB-SC). As alíquotas de BB-SR foram resfriados a 5°C/24h usando-se um refrigerador. As alíquotas do grupo BB-SC também foram resfriadas e, após equilíbrio a 5°C por 4h, foram colocadas em uma caixa de isopor de 21L, 5 cm acima da superfície do nitrogênio líquido. À tarde (A), no D0 (14h), os animais receberam BE 2,0 mg IM (Estrogin®) e um implante auricular (Crestar® 3,0 mg P4). No D9 (A), o implante foi retirado e os animais receberam eCG 400 UI IM (Folligon® 5000) + cloprostenol PGF2α 0,530 mg IM (Sincrocio®). No D10 (A), os animais receberam BE 1,0mg IM (Estrogin®), e, no D12 (8h da manhã), foram realizadas as IAs. No D42, a gestação foi diagnosticada por ultrassonografia. As taxas de concepção (TC) totais foram 48,2% SR e 34,6% SC para os anos de 2014 a 2017, com uma diferença significativa de 13,7% (P<0,05). Em conclusão, o sêmen resfriado resultou em maior TC do que o sêmen congelado em bubalinos leiteiros sob P4/E2 e eCG FTAI durante a estação reprodutiva desfavorável.(AU)

Effect of egg yolk-based extender and seminal plasma removal on sperm viability of cooled donkey semen / Efeito do diluente à base de gema de ovo e remoção do plasma seminal na viabilidade espermática do sêmen refrigerado de jumento

Developing effective cooled semen protocols is essential to increase pregnancy rates and reproductive efficiency in donkeys. This study aimed to evaluate the effect on sperm kinetic parameters and membrane integrity in cooled donkey semen diluted with defined milk proteins extender with 1% or 2% of egg yolk and the removal of seminal plasma. Twenty-four ejaculates from six jackasses were collected. Each ejaculate was divided into four aliquots that were diluted in extender with 1% (EY1) or 2% (EY2) egg yolk. One sample from each group was centrifuged, seminal plasma was removed (CEY1, CEY2 groups, respectively), and the samples were then refrigerated at 5 °C for 24 h. Fresh and cooled semen samples were assessed for sperm motility, morphology, and plasma membrane integrity. Total motility, progressive motility, sperm kinetic parameters, or live sperm cells were not statistically different when semen was cooled with an extender supplemented with 1% or 2% of egg yolk. Seminal plasma removal does not affect total motility or sperm kinetic parameters. However, progressive motility decreased (P<0.05) when semen was extended with 2% of egg yolk and seminal plasma was removed. Membrane integrity was affected (P<0.05) in centrifuged samples. In conclusion, the obtained results suggest that there is no difference in sperm kinetics and membrane integrity when 1% or 2% of egg yolk was added to the Equiplus extender. Also, the removal of seminal plasma by centrifugation did not have any beneficial effect on cooled donkey semen. Further studies are needed to relate these results with in vivo fertility tests with cooled donkey semen.(AU)

O desenvolvimento de protocolos de sêmen resfriado eficazes é essencial para aumentar as taxas de prenhez e eficiência reprodutiva em jumentos. O objetivo desse estudo foi avaliar o efeito do diluente à base de proteínas do leite com 1 ou 2% de gema de ovo sobre os parâmetros cinéticos do sêmen e integridade da membrana em sêmen resfriado de jumento, com ou sem a remoção do plasma seminal. Vinte e quatro ejaculados de seis jumentos foram coletados. Cada ejaculado foi dividido em quatro alíquotas e diluído em diluente com 1% (EY1) ou 2% (EY2) de gema de ovo. Uma amostra por grupo foi centrifugada e o plasma seminal removido (grupos CEY1 e CEY2, respectivamente). Os pellets foram novamente ressuspendidos nas mesmas concentrações e diluentes. Em seguida, as quatro alíquotas foram refrigeradas a 5°C por 24 horas. Amostras de sêmen fresco e refrigerado foram avaliadas quanto à motilidade espermática e integridade da membrana plasmática. Motilidade total, motilidade progressiva, parâmetros de cinética espermática ou células espermáticas vivas não apresentaram diferença significativa quando o sêmen foi resfriado com diluente suplementado com 1% ou 2% de gema de ovo. A remoção do plasma seminal não afetou a motilidade total ou os parâmetros de cinética espermática; entretanto, a motilidade progressiva diminuiu (P<0,05) quando o sêmen foi diluído com 2% de gema de ovo e o plasma seminal removido. Nas amostras centrifugadas, a integridade da membrana foi afetada (P<0,05). Em conclusão, os resultados sugerem que não há diferença na cinética espermática e na integridade da membrana quando 1% ou 2% de gema de ovo são adicionados ao diluente Equiplus e a remoção do plasma seminal por centrifugação não teve nenhum efeito benéfico no resfriamento de sêmen de jumento. Mais estudos são necessários para relacionar esses resultados com testes de fertilidade in vivo com sêmen resfriado em jumentos.(AU)

Physical characteristics and fertility of fractionated donkey semen cooled at 5°C / Características físicas e fertilidade do sêmen asinino fracionado e resfriado a 5ºC

The aim of this study was to evaluate the effect of two different extenders (Skimmed Milk Glucose - SMG or Lactose - Egg Yolk - LEY) on physical characteristics and fertility of fractionated donkey semen cooled at 5°C. For this, four Pêga donkeys were used as semen donors. The sperm rich fraction of the ejaculate was diluted preparing insemination doses containing 400 x 106 motile spermatozoa in a volume of 22 mL, cooled to 5°C and stored up to 48 hours in a container proposed by Palhares (1997). Sperm motility and vigor were assessed in fresh semen, after first semen dilution, before insemination, at 24 and 48 hours after storage. For the fertility evaluation, 44 mares were inseminated with semen stored for a period between 12 and 24 hours. The mares were inseminated on fixed days (Mondays, Wednesdays, and Fridays) after the detection of a follicle greater than a 30mm diameter in one of the ovaries through ovulation. Pregnancy diagnosis was performed on day 12 post-ovulation, using transrectal ultrasonography. Semen diluted in SMG showed superior sperm motility than LEY, at the Pre-AI evaluation (P<0.05). At 48 hours of storage, all donkeys had motility values between 45 and 53% for semen diluted in SMG, while only one donkey showed motility greater than 30% in the LEY treatment. The pregnancy rate/cycle for mares inseminated with semen diluted in SMG was superior than that obtained using LEY (56.52% vs 4.76%, respectively).(AU)

Objetivou-se com o presente experimento avaliar o efeito de dois diferentes diluidores (leite em pó desnatado glicose - SMG ou lactose gema de ovo - LEY) sobre as características físicas e a fertilidade do sêmen asinino coletado de forma fracionada e resfriado a 5ºC. Para isso, quatro jumentos da raça Pêga foram utilizados como doadores de sêmen. A fração espermática rica do ejaculado foi diluída preparando-se doses inseminantes contendo 400 x 106 espermatozoides móveis em um volume de 22 mL, resfriadas a 5ºC e armazenadas por até 48 horas em contêiner proposto por Palhares (1997). A motilidade e o vigor espermáticos foram avaliados no sêmen fresco, após a pré-diluição, antes das inseminações, às 24 e 48 horas de armazenamento. Para avaliação de fertilidade, 44 éguas foram inseminadas com sêmen armazenado por um período entre 12 e 24 horas, em dias fixos (segundas, quartas e sextas-feiras), após a detecção de um folículo de diâmetro maior ou igual a 30mm em um dos ovários, até a ovulação. O diagnóstico de gestação foi realizado a partir de 12 dias após a ovulação, por meio de ultrassonografia transretal. O sêmen diluído em SMG apresentou motilidade espermática superior à do LEY, já a partir do tempo pré-IA. Às 48 horas de armazenamento, todos os jumentos apresentaram valores de motilidade entre 45% e 53%, quando o sêmen foi diluído em SMG, enquanto apenas um jumento apresentou motilidade superior a 30% no tratamento utilizando LEY. A taxa de concepção/ciclo das éguas inseminadas também foi superior para o sêmen diluído em SMG em relação ao diluído em LEY (56,52% versus 4,76%, respectivamente).(AU)

Effect of month of conception on fertility of mares inseminated with jackass semen / Influência do mês da concepção sobre a eficiência reprodutiva de éguas inseminadas com sêmen asinino

Fertility obtained by cross-breeding mares (Equus caballus) with jackasses (Equus asinus) was evaluated. Two extenders, containing skim milk-glucose or egg yolk-glycine were used to study the fertility of mares inseminated with diluted jackass semen (T1 and T2) or diluted and cooled semen at 5°C for 12 hours (T3 and T4). A total of 272 cycles of 208 mares of undefined breeds were evaluated, being uniformly distributed between groups. The cycles were controlled by transrectal palpation and teasing, and mares were inseminated every Tuesday, Thursday and Saturday (three times/week), from the detection of a follicle with 3.0 to 3.5cm diameter in one of the ovaries until ovulation. Pregnancy was detected using transrectal palpation, teasing and ultrasound exams every 14 days. The extenders had no effect on fertility (P>0.05). Pregnancy rates for the first cycle were 64.52%, 61.11%, 50.72% and 54.17% and pregnancy rates/cycle were 63.64%, 54.55%, 52.69% and 47.06%, respectively, for T1, T2, T3 and T4. Differences in pregnancy loss rates between groups and effect of month of conception on fertility were found. Pregnancy loss rates were significantly higher (P<0.05) in January (38.46%) and in February and March (52.38%), with an average of 33.09%. The results indicate that mares conceiving at the end of the physiological reproduction time, carrying a mule embryo, are more susceptible to pregnancy loss.

Avaliou-se a eficiência reprodutiva de cruzamentos interespécies entre fêmeas equinas e reprodutores asininos da raça Pêga. Para tal, estudou-se o efeito de dois diluidores, à base de leite em pó desnatado-glicose ou glicina-gema de ovo, sobre a fertilidade de éguas inseminadas com sêmen fresco diluído (T1 e T2) ou diluído e resfriado a 5°C por 12 horas (T3 e T4). Foram utilizados 272 ciclos de 208 éguas mestiças, distribuídas uniformemente entre os tratamentos, após agrupamento por idade e categoria reprodutiva. Os ciclos foram acompanhados por palpação retal e rufiação, sendo as inseminações realizadas às terças, quintas e aos sábados (três vezes por semana), a partir da detecção de um folículo de 3,0 a 3,5cm de diâmetro, em um dos ovários, até a ovulação. As gestações foram acompanhadas por palpação transretal, rufiação e por ultrassonografia, realizada a cada 14 dias. As taxas de gestação obtidas, ao primeiro ciclo, não diferiram (P>0,05) entre os tratamentos, sendo de 64,52% para T1, 61,11% para T2, 50,72% para T3 e 54,17% para T4. Da mesma maneira, as taxas de gestação por ciclo também não foram influenciadas (P>0,05) pelos tratamentos, com valores de 63,64%, 54,55%, 52,69% e 47,06% para T1, T2, T3, e T4, respectivamente. No que diz respeito às taxas de perdas gestacionais, obtidas por meio das taxas de perdas e de perdas ajustadas, houve influência (P<0,05) dos tratamentos. Observou-se, ainda, efeito do mês da concepção, com taxas de perda superiores para os meses de janeiro (38,46%) e de fevereiro e março (52,38%), sendo a média de 33,09%. Sugere-se que a redução dos padrões de secreção do LH, ao final da estação de monta, responda pelas maiores taxas de perdas gestacionais do cruzamento interespécie, notadamente naquelas éguas que conceberam no final da estação de monta fisiológica dos equinos.

Efeito da categoria reprodutiva sobre a fertilidade de éguas inseminadas com sêmen asinino diluído e resfriado a 5ºC por 12 horas de armazenamento / Effect of mare status on fertility of inseminated mares with jackass semen diluted and cooled at 5ºC for 12 hours

Estudou-se o efeito da categoria reprodutiva sobre a fertilidade de éguas inseminadas com sêmen asinino diluído, resfriado e armazenado. Os ciclos foram acompanhados por palpação retal e rufiação, sendo as inseminações realizadas às terças, quintas e sábados, a partir da detecção de um folículo de 3,0 a 3,5cm de diâmetro, em um dos ovários, até a ovulação. O sêmen de cinco jumentos da raça Pêga foi diluído nos diluidores de leite em pó desnatado-glicose ou glicina-gema de ovo, resfriado a 5ºC e armazenado por 12 horas, sendo a dose inseminante de 400 x 106 espermatozoides móveis (no momento da diluição final, pré-resfriamento) depositada no corpo do útero. O diagnóstico de gestação foi realizado por meio de palpação transretal, rufiação e ultrassonografia, realizada a cada 14 dias. Os resultados de 195 ciclos, referentes a 141 éguas, foram agrupados de acordo com a categoria reprodutiva a que pertenciam: potra, égua solteira, égua parida e no "cio do potro". As taxas de concepção, ao primeiro ciclo, foram de 60,00%, 48,28%, 75,00% e 47,17% e, após quatro ciclos, de 61,54%, 47,13%, 54,76% e 47,17%, na mesma ordem para as categorias descritas anteriormente. A categoria reprodutiva não teve efeito (P>0,05) sobre a fertilidade das éguas inseminadas com sêmen asinino resfriado, sendo as potras, éguas solteiras, éguas paridas e no "cio do potro" igualmente eficientes para o uso na reprodução...

The effect of the mare status on fertility of mares inseminated with diluted, cooled and stored jackass semen, was studied. The cycles were controlled by transrectal palpation and teasing, and mares were inseminated every Tuesday, Thursday and Saturday, from the detection of a follicle with 3.0 to 3.5cm diameter in one of the ovaries until ovulation. The semen of five Pêga jackasses was diluted in skim milk-glucose or in egg yolk-glycine extender and cooled at 5ºC for 12 hours, with the inseminate dose of 400 x 106 motile spermatozoa (at the moment of the final dilution, before cooling). The inseminations were carried out in the uterine body. Pregnancy was detected using transrectal palpation, teasing and ultrasound exams every 14 days. The results of 195 cycles of 141 mares were grouped according to the mare status: maiden, barren, lactation or in foal heat. Pregnancy rates for the first cycle were 60.00%, 48.28%, 75.00% and 47.17%, and after four cycles, the pregnancy rates/cycle were 61.54%, 47.13%, 54.76% and 47.17%, respectively for maiden, barren, lactation and in foal heat mares (P>0,05). The mare status did not affect pregnancy rates of mares inseminated with diluted and cooled jackass semen and were efficient to use on reproduction...

Efeito da idade sobre a fertilidade e perdas embrionárias de éguas inseminadas com sêmen asinino diluído e resfriado a 5ºC por 12 horas de armazenamento / Effect of age on fertility and embryonic loss of mares inseminated with jackass semen diluted and cooled at 5ºC for 12 hours

Estudou-se o efeito da idade sobre a fertilidade de éguas inseminadas com sêmen asinino diluído, resfriado e armazenado. Os ciclos foram acompanhados por palpação transretal e rufiação, sendo as inseminações realizadas às terças, quintas e sábados, a partir da detecção de um folículo de 3,0 a 3,5cm de diâmetro, em um dos ovários, até a ovulação. O sêmen de cinco jumentos da raça Pêga foi diluído nos diluidores de leite em pó desnatado-glicose ou glicina-gema de ovo, resfriado a 5ºC e armazenado por 12 horas, sendo a dose inseminante de 400 x 106 espermatozoides móveis (no momento da diluição final, pré-resfriamento). Os resultados de 195 ciclos estrais, referentes a 141 éguas, foram agrupados em classes, de acordo com a idade das éguas: 2,5 a 6 anos, 6,5 a 10 anos, 10,5 a 14 anos e 14,5 a 19 anos. As taxas de concepção, ao primeiro ciclo, foram de 68,42%, 50,75%, 46,88% e 52,17% e, após quatro ciclos, de 69,57%, 47,92%, 46,34% e 45,71% para as faixas etárias de 2,5 a 6, 6,5 a 10, 10,5 a 14 e 14,5 a 19 anos, respectivamente (P>0,05). A idade não teve efeito sobre a fertilidade das éguas inseminadas com sêmen asinino diluído e resfriado...

The effect of the mare age on fertility of mares inseminated with diluted, cooled and stored jackass semen was studied. The females were controlled by transrectal palpation and teasing, and inseminated every Tuesday, Thursday and Saturday, since the detection of a 3.0 to 3.5cm follicle diameter, in one of the ovaries, until ovulation. The semen of five Pêga jackasses was diluted in skim milk-glucose or in egg yolk-glicine extender and cooled at 5ºC for 12 hours, with the inseminate dose of 400 x 106 motile spermatozoa (at the moment of the final dilution, before cooling). The results of 195 cycles of 141 mares were grouped, in accordance with the age: 2.5 to 6 years, 6.5 to 10 years, 10.5 to 14 years and 14.5 to 19 years. The pregnancy rates for the first cycle were 68.42%, 50.75%, 46.88% and 52.17%, and after four cycles, the pregnancy rates/cycle were 69.57%, 47.92%, 46.34% and 45.71%, respectively for 2.5 to 6, 6.5 to 10, 10.5 to 14 and 14.5 to 19 years (P>0,05). The mare age had no influence on fertility, using diluted and cooled jackass semen...

Cysteine addition on short-term cooled boar semen preservation and its relationship with swine field fertility / Adição de cisteína na preservação de sêmen suíno refrigerado e sua relação com a fertilidade suína

Artificial insemination is routinely used in the swine industry to reduce the costs of production through to increase the efficiency of the refrigerated boar semen process. The objective of this study was to evaluate the effect of different levels of cysteine (CYS) added to the Beltsville Thawing Solution (BTS) extender semen during cooling for up to 72 hours. Ejaculated from three boars were collected with the gloved-hand technique and semen aliquots were diluted in BTS as follow: BTS only (BTS), BTS + 0.1mM cysteine (CYS0.1), BTS + 0.5mM cysteine (CYS0.5), BTS + 1.0mM cysteine (CYS1.0), BTS + 2.5mM cysteine (CYS2.5), BTS + 5.0mM cysteine (CYS5.0), BTS + 10.0mM cysteine (CYS10.0), and BTS + 20.0mM cysteine (CYS20.0). Evaluation of sperm integrity were analyzed using 0.5mg/ml propidium iodide (plasma membrane), 100µg/ml isothiocynate-conjugated Pisum sativun agglutinin (acrosomal membrane) and 153µM 5,5',6,6'-tetrachloro-1,1',3,3'-tetraethylbenzimidazolyl carbocyanine iodide (mitochondria potential) after semen dilution at specific times (0, 24, 48 and 72 hours). Additionally, we also evaluated the effects of 5.0 mM CYS addition in the BTS extender on the maintenance of sperm quality and their influence on fertility in the swine production. After artificial insemination, animals were evaluated based on the estrous return and the number of piglet's born. Cysteine at concentrations of 10.0 and 20.0mM resulted in more pronounced reductions even at the time zero. Semen viability decreased to levels below 10 percent at these high levels of CYS in the first 24 hour of storage at 17ºC. At the end of the storage time, less than 65 percent of sperm cells had intact plasma membrane in all groups. The sperm viability decreased significantly when the semen was added at high concentrations of CYS (time "0"; CYS10.0 and CYS20.0; p<0.05), when compared to the other CYS concentrations. The BTS (10.20±0.39) treated group showed a lower rate of estrus return when compared to other (BTSCYS; 86.05±039), and it showed also the highest total number of piglets borne per treatment (12.71±3.38 vs. 9.00±3.38, respectively). In conclusion, the addition of CYS in the BTS semen extender did not maintain spermatic viability of boar cooled spermatozoa and it results in a higher percentage of return to estrus and lower number of piglets borne.

A inseminação artificial é usada rotineiramente na indústria suinícula para reduzir os custos de produção além de obter maior eficiência reprodutiva durante o processo de resfriamento do sêmen. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da adição de diferentes concentrações de cisteína (CIS) ao diluidor de sêmen Beltsville Thawing Solution (BTS) resfriado sobre a qualidade espermática por até 72 horas. Foram coletados ejaculados de três cachaços e as amostras de sêmen foram diluídas em BTS, conforme os seguintes tratamentos: BTS (grupo controle); CIS0,1 (BTS + 0,1mM de cisteína); CIS0,5 (BTS + 0,5mM de cisteína); CIS1,0 (BTS + 1,0mM de cisteína); CIS2,5 (BTS + 2,5mM de cisteína); CIS5,0 (BTS + 5,0mM de cisteína); CIS10,0 (BTS + 10,0mM de cisteína) e CIS20,0 (BTS + 20,0mM de cisteína). A avaliação da integridade espermática foi determinada através de sondas fluorescentes em uma combinação de 100µg/mL FICT-PSA (isotiocinato de lecitina), 0.5mg/ml PI (iodeto de propidio), e 153µM JC-1 (5,5',6,6'-tetracloro-1,1',3,3'-tetraetillbenzimidazolil iodeto de carbocianina). As avaliações dos tratamentos foram realizadas 0, 24, 48 e 72 horas após a diluição do sêmen. Adicionalmente, foi avaliado o efeito da adição de 5,0 mM de cisteína ao diluidor BTS na manutenção da qualidade espermática e no efeito na fertilidade em suínos. Após a inseminação artificial, as fêmeas foram avaliadas quanto a taxa de retorno e o tamanho da leitegada. Durante todos os períodos analizados, os grupos CIS10,0 e CIS20,0 apresentaram menor número de espermatozóides viáveis em relação aos demais grupos. A viabilidade espermática diminuiu a níveis abaixo de 10 por cento nos tratamentos CIS10,0 e CIS20,0 nas primeiras 24 horas de armazenamento a 17ºC. Ao final do período de armazenamento todos os grupos apresentavam média inferior a 65 por cento de espermatozóides com a membrana plasmática intacta. A viabilidade espermática diminuiu significativamente quando altas concentrações de CIS (hora "0"; CIS10,0 e CIS20,0; p<0.05) foram adicionadas ao sêmen comparadas com as demais concentrações. O grupo BTS (10,20±0,39) apresentou menor taxa de retorno ao estro comparado com BTSCIS (86,05±0,39), além de apresentar maior número de leitões nascidos (12,71±3,38 vs . 9,00±3,38, respectivamente). Portanto, podemos concluir que a adição de CIS ao diluidor BTS não mantém a qualidade espermática e resulta em maior taxa de retorno ao estro e menor número de leitões nascidos.

Efeito da porção do ejaculado e do método de resfriamento sobre as características físicas do sêmen suíno / Effect of ejaculate portion and conservation method on the physical characteristics of boar semen

Duas porções do ejaculado suíno - primeiros 15mL da fração espermática rica (P1) e o restante do ejaculado (P2) - foram coletadas semanalmente de cinco varrões e submetidas a dois protocolos de resfriamento, diluição no diluidor MR-A® e conservação a 17°C (T1) ou no diluidor glicina-gema de ovo e conservação a 5°C (T2). As doses foram avaliadas no que se refere à motilidade, ao vigor e à morfologia espermáticas no sêmen a fresco e em diferentes tempos de estocagem. Todos os tratamentos mantiveram uma motilidade aceitável, superior a 50 por cento, nas primeiras 24 horas de armazenamento. O grupo P2T2 manteve uma motilidade similar (P>0,05) ao longo de todo o período de resfriamento (72 horas), sendo inclusive superior aos demais neste período, enquanto os outros tratamentos apresentaram uma redução da motilidade no decorrer do tempo de armazenamento. Com relação às características morfológicas do sêmen, não se observaram diferenças (P>0,05) quanto às porcentagens de espermatozoides normais entre as duas frações do ejaculado fresco. Ainda, todos os tratamentos mantiveram-se dentro dos limites aceitáveis, independentemente do tempo de armazenamento. A P1 parece ser mais adequada à produção de doses para o transporte em virtude de seu pequeno volume e alta concentração, enquanto o restante do ejaculado (P2) pode ser utilizado com eficiência dentro da própria granja.

Two portions of boar ejaculate - first 15mL of the sperm rich fraction (P1) and the rest of the ejaculate (P2) - were collected weekly from 5 mature boars and submitted to two cooling methods, extended in MR-A® and cooled at 17°C (T1) or extended in glycine-egg yolk and cooled at 5°C (T2). Spermatozoa motility, vigor, and morphological characteristics were evaluated immediately after collection and in different storage times. All treatments kept an acceptable motility, higher than 50 percent, in the first 24h of storage. The P2T2 maintained a similar motility (P>0.05) throughout the cooling storage (72h) and was superior in that period, while the other treatments presented a decrease in motility related to time. There was no difference between the two portions regarding the total number of normal spermatozoa in the fresh semen (P>0.05). All treatments showed morphological abnormalities within the acceptable thresholds, irrespectively of the storage time. Thus, due to low volume and high concentration, P1 seems to be more adequate for sperm dose transportation. Furthermore, this methodology will allow the development of new proposals concerning the transportation of swine semen, while the rest of the ejaculate could be used in farm routines to produce conventional liquid semen doses.

Parâmetros reprodutivos de cabras Toggenburg inseminadas com sêmen resfriado, após diluição em meio à base de gema de ovo / Reproductive parameters of Toggenburg goats inseminated with cooled semen diluted in egg yolk extender

Avaliaram-se a taxa de concepção, a resposta à prostaglandina, a duração do estro, a categoria reprodutiva e o tipo de muco de cabras inseminadas com sêmen diluído em meio à base de gema de ovo e resfriado a 5ºC, por 12 ou 24 horas. Foram utilizados dois reprodutores e 62 fêmeas da raça Toggenburg, que receberam duas doses de 22,5µg de PGF2α, em intervalos de 10 dias, para a sincronização do estro. A partir da primeira aplicação de PGF2α, o estro foi monitorado três vezes ao dia. Realizou-se uma única inseminação, 12 horas após o início do estro. As porcentagens de fêmeas em estro, após a primeira e segunda aplicações de PGF2α, foram de 85,5 por cento e 88,7 por cento, respectivamente. O intervalo de aplicação da primeira e segunda doses de PGF2α ao início do estro foi de 41,04±20,32 e 45,67±9,28 horas, e a duração do estro de 40,02±15,96 e 32,24±12,09 horas, respectivamente. A taxa de concepção total foi de 49,1 por cento. O período de armazenamento do sêmen e a categoria reprodutiva não influenciaram (P>0,05) a taxa de concepção. O tipo de muco observado no momento da inseminação influenciou (P<0,05) a fertilidade das fêmeas, sendo o de aspecto estriado associado aos maiores índices de concepção.

The conception rate, the prostaglandin response, the estrus duration, the reproductive class, and the mucous of goats inseminated with semen diluted in egg yolk extender and cooled at 5ºC, for 12 or 24 hours were evaluated. Sixty-two female goats and two sexually mature Toggenburg bucks were used. The females received two doses of 22.5µg of prostaglandine F2α, at 10-day intervals. After the first injection, the estrus was monitored three times a day (6:00, 12:00, and 18:00h), with a buck teaser. Only one insemination was used. The percentages of animals that showed estrus after the first and the second injection of PGF2α were 85.5 percent and 88.7 percent, respectively. The average intervals from first and second PGF2α injection to estrus were 41.04±20.32 and 45.67±9.28h, and the estrus durations for both injections were 40.02±15.96 and 32.24±12.09h, in this order. The interval from the PGF2α injection to the beginning of the estrus was longer (P<0.05), whereas the estrus duration was shorter (P<0.05) in the estrus induced after the second PGF2α injection. The total conception rate was 49.1 percent. Neither the semen storage length (12 or 24 hours) nor the reproductive class did not affect (P>0.05) the conception rate. The mucous observed at the insemination time influenced (P<0.05) the fertility of inseminated goats, with the striated aspect associated to higher fertility.

Taxa de concepção de cabras inseminadas com sêmen caprino resfriado a 5ºC, por 12 ou 24 horas, em meio diluidor à base de gema de ovo / Conception rate of goats inseminated with semen cooled in egg yolk diluent at 5ºC, for 12 or 24 hours

Avaliou-se a capacidade fecundante do sêmen caprino resfriado a 5ºC, por 12 (TI) ou 24 horas (TII), em container especial. Para tanto, utilizaram-se 62 fêmeas e dois reprodutores (B1 e B2) da raça Toggenburg, distribuídos em um esquema fatorial 2x2 (dois reprodutores e dois períodos de estocagem do sêmen). Após a coleta, o sêmen foi diluído em Tris-frutose-gema de ovo a 2,5 por cento, envasado em palhetas de 0,25mL, com 150x10(6) espermatozoides móveis e resfriado a 5ºC. As fêmeas receberam duas doses de 22,5µg de PGF2α, em intervalos de 10 dias para a sincronização do estro. A partir da primeira aplicação de PGF2α, as fêmeas foram monitoradas para ocorrência de estro, três vezes ao dia. Realizou-se uma única inseminação, pela técnica de fixação da cérvice, 12 horas após o início do estro. A motilidade e o vigor, após 12 ou 24 horas de resfriamento, foram de 66,14±0,11 por cento e 62,50±0,05 por cento, e 3,46±0,61 e 3,27±0,50, respectivamente. Não houve influência (P>0,05) do reprodutor, nem do período de armazenamento do sêmen sobre a taxa de concepção das cabras, que foi de 49,1 por cento.

The fertilizing capacity of goat semen cooled in egg yolk diluent at 5ºC, for 12 or 24 hours was evaluated. Sixty-two Toggenburg does and two sexually mature Toggenburg bucks were used in a fatorial treatment combination (two bucks and two storage periods). The semen was diluted in 2.5 percent Tris-frutose-egg yolk; envased in 0.25mL plastic straws, with 150x10(6) mobile spermatozoa; and cooled at 5ºC for 12 or 24 hours. The females received two doses of 22.5µg of prostaglandine F2α, at each 10-day intervals in order to synchronize the estrous. From the first PGF2α injection, estrous occurrence was monitored three times per day. Only one insemination was used, using the cervix fixation method, 12 hours after the estrous onset. The means of motility and strength, 12 (TI) and 24 hours (TII) after semen cooling at 5ºC, were 66.14±0.11 percent and 62.50±0.05 percent, and 3.46±0.61 and 3.27±0.50, respectively. Neither the sire nor the period of semen influenced (P>0.05) the conception rate of the does, which was 49.1 percent.

Efeito da adição de cloreto de cálcio sobre a qualidade espermática e atividade da aspartato amino transferase no sêmen resfriado de suíno / Effect of adding calcium chloride on the spermatic quality and aminotransferase aspartate in cool swine semen

O experimento foi realizado com o objetivo de testar dois processos de resfriamento de sêmen suíno, analisar o efeito da adição de CaCl2 ao diluidor BTS e testar o método de avaliação do perfil enzimático da Aspartato Aminotransferase (AAT) sobre a qualidade espermática. Foram utilizados 12 ejaculados suínos de animais procedentes do setor de Suinocultura - DZO/UFLA. Estes ejaculados foram diluídos e receberam diferentes concentrações de CaCl2 (A: 0,0; B: 2,5; C: 5,0 e D: 7,5 mM). As amostras dos ejaculados foram submetidas a três processos de resfriamento (1: convencional - 15º C ; 2: lento - 15º C/5º C; 3: rápido - 5º C), sendo que cada ejaculado ficou armazenado por um período de 72 horas para avaliações da qualidade espermática, constituindo os tratamentos experimentais. Os parâmetros seminais avaliados foram motilidade e vigor espermáticos e perfil enzimático da AAT. Houve diferença significativa (P<0,05) quanto aos níveis de CaCl2 para o parâmetro de motilidade espermática, sendo que níveis maiores deste sal apresentaram resultados mais favoráveis à motilidade espermática. Para as variáveis vigor espermático e para o perfil da AAT não foi observado efeito da adição deste sal. Quanto ao processo de resfriamento, foi observada diferença significativa (P<0,05) para os parâmetros de motilidade e vigor espermáticos. Para o perfil enzimático não foi observado diferença significativa (P>0,05). Conclui-se que a adição de CaCl2 melhora a motilidade espermática das amostras dos ejaculados suínos e que o processo de resfriamento lento substitui o processo convencional sem afetar a qualidade espermática do sêmen submetido à refrigeração. A avaliação da AAT não é válida para sêmen resfriado.

The study was carried out with objective to test two swine semen cooling processes and verify the effects of adding chloride of calcium (CaCl2) on semen dilutor BTS and also to test the evaluation method of Aspartate Aminotransferase (AAT) enzymatic profile on the cooled swine semen spermatic quality. Were used twelve samples of ejaculation of breeders supplied by the Swine Breeding section at the DZO/UFLA. The samples were diluted and received different concentrations of CaCl2 (A: 0.0; B: 2.5; C 5.0; D 7.5mM). The samples of ejaculation were submitted to three processes of cooling: 1 - standard cooling (15º C); 2 - slow cooling (15º C/ 5º C); 3 - fast cooling (5º C), and each sample of ejaculation was stored for a period of 72 hours to evaluation of spermatic quality, over all experimental treatments. The seminal parameters evaluated were the spermatic motility and strength and enzymatic profile of the AAT. A meaningful difference was verified (P< 0.05) in the levels of CaCl2 for the parameters of spermatic motility, high levels of this salt showed better results in this parameter . The variables spermatic strength and AAT profile, shown no effects for any addition of CaCl2 . For the cooling process, a meaningful difference was verified (P<0.05) in the parameters of spermatic motility and strength. No effects were observed concerning the enzymatic profile of the AAT (P>0.05). It was concluded that the adding of CaCl2 did improve the spermatic motility of the samples of swine ejaculations and that the process of slow cooling is able to replace the standard process without affecting the spermatic quality of semen submitted to cooling. The assessment of AAT is not valid to cooled semen.